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非木质化细胞壁在pH值为3~7或8范围时强烈吸收吖啶橙并发射红色荧
光。在可见光下细胞壁呈黄色,表明细胞壁对酸性基网大量吸附。当植物
组织切片用pH值低于3的吖啶橙溶液处理时,非木质化细胞壁发绿色荧光。
这说明即使在如此低的pH值时,也有i及附吖啶橙的痕迹,但细胞壁在可见
光中无色。在pH值低于3时,吖啶橙的吸收机制不是象pH值大于3的红色荧
光发射那样靠阳离子的静电吸附
由于木质素含有苯酚基团,术质化细胞壁可由化学物质沉淀进行染色
,而且碱性染色刹强烈积累几乎与pH值和离子化状态无关。
化学物质沉淀染色是稳定而又不可逆的,因而使用盐溶液不会发生象
电吸附染色剂那样的洗脱现象。用吖啶橙处理的木质化细胞壁发射一种明
亮的黄绿荧光。染色剂&!jNH。基和木质素的酚OH基问的氢键可能在这种
强烈吸附中起作用。这种染色可以看作已经是某种形式的直接染色,这是
因为荧光偏振显示出吸附约染色剂离子是以有序的方向排列的。
(3)直接染色。细胞壁的直接染色是染色剂分子或具有相当体积的染色
剂分子团聚体在细胞壁的皿显微孔隙系统内部的沉积。
直接染色剂最好的例予是刚果红。蕨原叶体妁假根细胞壁的密度较小
,可以用剐果红染色。原叶体细胞的密度较大的胞壁,即使用锇酸或其它
有毒物质处理后也不能为冈6果红染色。然而,当用脂溶或蟠溶物质(如沸
腾的酒精,KOH等)对这些细胞壁处理后,就能用刚果红染色。很大可能是
孔被打开或角质层被溶解了,因此刚果红可以进入细胞壁内部的亚显微细
胞问系统。
直接染色与染色溶液的pH值及细胞壁的酸性基团的离解程度无关。直
接被染色的细胞壁往往表现出二色性,这说明染色剂分子在亚显微的毛细
管系统内有某种程度的定位。二色性指的是样本在偏振光中根据偏振板的
方向形成的颜色密度的变化。
液泡的活体染色
在液泡内发现的物质积累主要由于细胞沟代谢活性。某些酸性染色剂
也可通过主动吸收进入液泡
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