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本文标题："食品微生物中的应用-检测细胞图像显微镜"
新闻来源：未知 发布时间：2018-9-18 23:11:57 本站主页地址：http://www.jiance17.com
食品微生物中的应用-检测细胞图像显微镜
qPCR是在循环过程中，通过荧光探针检测扩增所得的基因产物的方法，可
在30～90 rain内得出结果。有许多可用的荧光探针，例如SYBR Green I和
荧光能量共振转移探针。这些探针可用来监测反应全过程并且省去了最终
产物的电泳。荧光能量共振转移探针是与DNA单链互补的短链寡核苷酸[2¨
]。当用这一方法检测水和下水道样品中的蓝氏贾第虫(以pgiardin基因为
目标)和小球隐孢子虫(COWP基因为目标)时，检出限前者为1个细胞，后者
为100个细胞。
采用SYBR Green工染料，在PCR循环的最后通过分析融解曲线而鉴定PC
R产物，因为PCR产物有特定的融解温度。针对不同组中的特定基因，这一
方法被用于同步检测沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌(L．monocytogen
es)。对29株沙门氏菌和18株单核细胞增生李斯特氏菌(L．monocyto—gene
s)。经过过夜浓缩富集，这一方法可检测到2．5个细胞的沙门氏菌血清型
和1个细胞的单核细胞增生李斯特氏菌(L．mo加cyzog鲫Ps)【¨嘲。qPCR技
术也被用于E．coli stxl和stx2基因的同步检测㈣|。采用SYBR Green I荧
光染料的qPCR技术被用于检测牡蛎组织匀浆和Gulf水域中的创伤弧菌，经
过5 h的浓缩富集，这一方法可以检测到一个细胞，如果不经过浓缩富集，
可从1 g牡蛎组织匀浆或者10 mL Gulf水中检测到102个细胞。该方法以专
一性的溶血毒素基因vvh为目标，整个实验完成时间不超过8 h。Lux荧光基
因
海洋细菌如费氏弧菌(Vibrio JTscheri)和哈维氏弧菌(V harveyi)的
发射荧光是由基因控制的，并且发射荧光的能力可通过转移某些控制基因
而使其他生物获得。编码荧光素的基因包括luxA和luxB，前者编码荧光素
口亚基，后者编码p亚基。该细菌编码生物发光操纵子中的另外8个基因不
必转移。荧光噬菌体在食品微生物中的应用，一种噬菌体只对特定的目的
菌专一感染，因此在噬菌体和宿主之间具有高专一性联系的优点(见本章后
面噬菌体分类和第二十章噬菌体部分)。如果小肠结肠炎耶尔森氏菌(y．en
tero—colitica)是目标菌，则特定的噬菌体只会对种内的广泛菌株专一感
染，而其他即使亲缘关系很近的菌种也不会被感染。噬菌体的荧光基因是
通过重组方法插入的，大小约为2 kb。它本身由于缺少发光所需的成分，
因此本身并不发出荧光。当被加入到其宿主菌中时，携带有荧光基因的噬
菌体进入宿主并复制
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