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免疫放射分析
免疫放射分析(radioimmunoassay)对抗原进行放射性标记,利用标记抗
原与特异性抗体结合,随后利用放射性测量仪检测与抗体结合的抗原的数
量。固态放射性免疫(solid—phase radioimmunoassay,RIA)测定是利用
单层的抗体分子与固体表面或物质结合,使用的固态物质有:聚丙烯、聚
苯乙烯、溴乙酰纤维素。RIA的关键在于被抗体包围的聚合物可以与放射性
物质标记的抗原结合。当冲洗掉游离的标记抗原后,进行放射性定量检测
。试验中利用最多的标记物。”5]I。
Johnson等人u…妇改良了固态RIA,用于金黄色葡萄球菌(S.a b11*eb
!,S)肠毒素B的检测,发现改良的RIA方法比免疫扩散技术的灵敏度高5~20
倍。研究者发现试验中使用聚苯乙烯和积分放射计数检测,灵敏度为1~5
ng。CollinsE蚓等人在使用RIA时,利用与溴乙酰纤维素相结合的浓缩抗体
检测肠毒素B。结果发现RIA比免疫扩散技术(immunodiffusion)灵敏度高10
0倍,对内毒素B的检测检测水平为0.01 tlg/mI。。Collins等人从火腿
、牛乳、羊肉等多种食品提取葡萄球菌肠毒素A,利用RIA技术分析检测,3
~4 h内可以完成。同以前的研究者一样,他们认同RIA方法具有较高的灵
敏度,可以用于0.00l txg/mL的检测;对肠毒素A的检测,可以定量的准
确度为0.01 txg/mL。
通过肠毒素的碘化作用,固态RIA技术可以检测1 ng/g的毒素‘17]。
当蛋白质A作为免疫吸收物用于抗原一抗体系统从没有反应的毒素中分离时
,灵敏度<1.0 ng/g的葡萄球菌肠毒素A(SEA)、SEB、SEC、SED、SEE,1
天内可以得到结果口7‘1 4 2I。另一项研究中,利用蛋白质A时,可以检
测到0.1 ng/mL的SEA、0.5 ng/mI。的SEA和0.5 ng/mI。的SEB[33;
利用双抗体RIA技术,对SEC2的检测灵敏度为100 P91171|。
RIA技术可以用于食品及其他的生物危害的检测,例如,内毒素、贝类
食品中麻醉性砷中毒毒素及其他。利用¨5I标记的同源抗体过滤器,在微
孔膜上冲洗,8~10 min内能够得到结果[1 98]。由于RIA技术需要同位素
以及其缺乏轻便性,目前RIA技术很少用于食品中微生物的检测。
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