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本文标题："酵母菌和霉菌琼脂培养基过夜培养分析显微镜"
新闻来源：未知 发布时间：2018-9-17 23:12:04 本站主页地址：http://www.jiance17.com
酵母菌和霉菌琼脂培养基过夜培养分析显微镜
疏水格栅滤膜过滤器
疏水格栅滤膜过滤(hydrophobic grid membrane filter，HGMF)技术
是由Sharpe和MichaudE¨8’¨9]发明，随着它被进一步的发展，用于各种
食品中微生物的检测计数。这种方法使用了一个特殊构造的过滤器，在这
种膜过滤器的一面包含了1 600个蜡状的格栅，每一个格栅都能够限制菌落
的生长和大小。每一个膜过滤器，可以利用MPN自动计数口…，计数范围在
(10～9)×101。这种方法能够检测的细胞下限数为10／g，大约24 h内完成
口“]。HGMF用于检测计数所有的cfus和特殊的菌群凹J“”]，如真菌类(f
ungi)。17]、沙门氏菌‘”o和假单胞菌[6“。AOAC认可了大肠菌群总数、
粪大肠菌群菌、沙门氏菌、酵母菌和霉菌的HGMF方法。用于真菌的ISO—GR
ID法，使用了一个特别的培养基平板：含有两种抗细菌抗生素和锥虫蓝(tr
ypan blue)。后者使真菌菌落染成蓝色，在48 h内能够检测下限数值为10
cfu的菌落数。
HGMF典型的应用是将1 mI。的1：10的样品液通过过滤膜过滤，然后把
这个膜放置在一个适合的琼脂培养基过夜培养，让菌落生长。用MPN法计算
生长菌落的格栅。这种方法允许每张过滤膜过滤l g食品样品[1】7]。对于
食品中大肠杆菌(E．coli)的检测，SD-39琼脂ISO—GRID法比4一甲基伞形
基一pD一葡萄糖苷酸(4-methylumbelliferyl一／3-D—glucuronide)琼脂
协同LMG(1actose monensin glucur—onate)琼脂ISO—GRID法具有更好的
通用性；尽管后者能够灵敏地检测大肠杆菌(E．coli)0157：H7和MUG阳性
菌株¨“。SD-39琼脂法能够在24 h左右产生结果，灵敏度<10，而LMG法需
要大约30 h。
对5个试管的大肠菌群分别进行MPN和HGMF同步计数，大肠菌群和粪大
肠菌群在计数上具有相同的结果n…。在进行HGMF检测时，首先，HGMF过滤
膜被放置在胰酶解酪蛋白一黄豆琼脂培养基上，35℃，培养4～5 h(目的是
为了修复受损的细胞)；随后，把它移到m—FC琼脂中再培养。基于酶标记
抗体(enzyme—labeled antibody，ELA)操作的HGMF已经得以发展，主要用
于食品中致病性大肠杆菌0157：H7(hemorrhagic colitis，HC；出血性肠
炎)菌株检测口26]。这种方法使用了一种特殊培养基平板，能够保证HC类
型菌株在44．5℃生长。这种特殊的琼脂培养基仅含有0．113％#3牛胆盐，
而HC琼脂培养基中含有0．15％。该方法的能够检测出绞细牛肉中的大约90
％的HC类型菌株E124]。HGMF—ELA法使用HC琼脂43。C、培养16 h，冲洗掉
膜上的菌落，将膜浸入单克隆抗体一一辣根过氧化物酶一蛋白A联合体的封
闭溶液体系中。这种方法，EI。A阳性菌落呈紫色，95％的HC类型菌株能在
24 h内测出，且在肉中的检测到HC菌株的极限达到10 cfu／g。
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