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直接外荧光过滤器技术
这种膜过滤技术被认为是基本方法的改良。直接外荧光过滤器技术(di
rect epifluorescent filtertechnique,DEFT)将荧光染色和荧光显微技
术结合,是一种快速的食品微生物检测技术和方法。稀释的食品样品液通
过5 p.m的尼龙过滤膜进行过滤,收集过滤液并用2 mI。去利通(Triton;
译者注:非离子型表面活性剂的商品名)X一100和0.5 mL胰岛素进行处理
。这种试剂用来溶解肉体细胞和防止阻塞过滤器。培养之后,过滤液通过0
.6肛m孔径的聚碳酸酯过滤膜过滤,随后滤膜被11'f啶橙着色、干燥后,
使用外荧光显微镜计数被着色的细胞,显微镜下每个区域细胞的平均数相
加即得每克样品的细胞数。20~30 min得到结果,应用此方法测得肉和乳
制品中的微生物数量约为6 000 cfu/g。
直接外荧光过滤技术应用于乳品中凹…,与APC法和DMC法所获得的结
果类似,在5×103~5×108 cfu/mI。。在大约10 min内,这种方法能够
检出乳品种活性革兰氏阴性菌和全部的革兰氏阳性菌no…。大约20 min内
,可以计数热处理乳及乳制品中的微生物,检测下限细菌数少到5 700 cfu
/mI。[9 8。。通过6个实验室协作研究,对比了DEFT(直接外荧光过滤器
法)和APC(好氧平板计数法),通常情况下两者的相关系数在0.9以上。但
是DEFT(直接外荧光过滤器法)的重复性要比APC(好氧平板计数法)的重复性
差1.5倍,而实验的再现性却仅是APC(好氧平板计数法)的3倍[9“。DEFT(
直接外荧光过滤器)法可以计数过滤后的固体食品
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