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涂布平板时,通常孢子悬液涂布平板培养皿
用链霉菌孢子悬液涂布平板
链霉菌抱子(甚至菌丝片段)具有良好的抗渗透压破坏的能力
,可直接从20%甘油或浓蔗糖溶液中用蒸馏水配制稀释液。
对于精确的研究工作?我们通常分别吸取0.5或lml孢子悬液
加到4。5或9ml水中稀释10倍。如果吸取的量很精确,每次稀释后
都充分混匀,也可将0.1ml孢子悬液加到o.9ml水中稀释(当然每
次稀释都要更换新的吸管)。0.1ml的孢子悬液也可加到9.9ml水
中稀释100倍。
涂布平板时,我们通常在每个标准培养皿中加o.1ml孢子悬
液,然后用玻璃刮铲涂匀。当做一系列相同稀释度或较低稀释度(
即饺浓的孢子悬液)的稀释时,刮铲上携带的孢子可以忽略不计,
此时使用同一个刮铲可节省时间(通常当平板培养基是含不同生长
因子的选择培养基时,不能使用同一刮铲,因为刮铲上所沾带的
微量生长因子足以导致“背景”生长)。
欲要求菌丝具有浓密地坪状生长,如当需要观察麻点(pock)
或做平板杂交时,通常在涂布完平板后,将平板置于超静工作台
上吹干水份(如果涂布平板前吹干平板,会使孢子悬液很快吸入乎
板,导致块状生长区的出现)。如果要得到分离的菌落,比如说杂
交后要获得单个分离的重组子,通常在涂布平板后没有必要吹干
平板,只要将平板正面朝上培养约一天即可。
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