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本文标题："采用悬浮培养细胞实验-培养皿用倒置显微镜"
新闻来源：未知 发布时间：2018-1-30 0:31:17 本站主页地址：http://www.jiance17.com
采用悬浮培养细胞实验-培养皿用倒置显微镜
在软琼脂上的克隆化生长
尽管单层培养克隆化可应用于从肿瘤直接培养的细胞，但近年
的大多数报告均采用悬浮培养克隆化以减少具有贴壁依赖性的基质
细胞的生长。克隆形成检测具有理论上的优点，即仅在具有很强的
自我更新能力的细胞(可能是肿瘤细胞)中检测反应，而对增殖能力
有限的细胞，它构成肿瘤的主体，则不检测。然而，这仅在细胞集
落是真正的克隆的时候才行，并且仅在细胞克隆生长许多代以后才
进行。遗憾的是，实际情况并非总是如此。克隆形成率通常为0．o
l％一o．1％，它可能很难排除细胞团的出现。当单层克隆化细胞
可获得10代(一1000个细胞)时，悬浮克隆通常在4—6代后(16—64
个细胞)才可获得。假定其中的一些克隆从3—4个细胞的细胞团开
始，那么，传代次数低到2次及细胞的自我更新能力就很值得怀疑
。- 但是1在软琼脂上的生长确定是对细胞系有用的系统，它具有
较高的接种率。但使用取自病人的实体瘤和渗出物进行实验则已碰
到许多技术问题，它仃1影响对结果的解释。这些问题包括：较难
从表皮瘤获得纯的细胞悬液(这是克隆化生长概念的先决条件)；接
种率很低(《1％)；在某种生长条件下，贴壁依赖细胞形成克隆；
需要大量的细胞；以及克隆计数上带有一定程度的主观性等。这些
代表着现有技术的失败而并非检测方法的失败。已有作者强调过分
离和选择适于不同类型肿瘤细胞的生长培养液的最佳方法的重要性
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