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本文标题:"纤维素作为碳源培养基来筛选生长萄糖苷酶基因"

新闻来源:未知 发布时间:2017-8-30 3:08:59 本站主页地址:http://www.jiance17.com

纤维素作为碳源培养基来筛选生长萄糖苷酶基因

    葡聚糖酶活性的检测卜落在可溶纤维素[CMC)的琼脂上土长,
能合成相分泌内识葡聚糖酶蛇菌
    落周围产生黄晕环(白斑处)
    这项技术已经成功地应用于从链霉菌、梭状菌、嗜热厌氧菌、
嗜热单胞菌、伊文杆菌、假单胞菌、纤维弧菌、瘤胃球菌、纤维单
胞菌、纤维状细菌和杆菌等中分离出内切葡聚糖酶基因,
    没有一种平板筛选方法可以很方便地检测克隆了外切葡聚糖酶
基因的细胞,因此应用免疫学方法来检测表达外切葡聚糖酶的重组
子。虽然需要与目的蛋白相对应的特异性抗体,但这种方法不需要
分泌蛋白就可以检测出来。先将重组细胞原位裂解.如暴露于氯仿
蒸气中,再将细胞质蛋白转入尼龙膜或硝化纤维膜以便进行免疫测
试。检测中,复制平板宋保证细胞进一步利用和繁殖。
    将子葡萄糖苷酶的基因库转化大肠杆菌,分离原核生物的庐葡
萄糖苷酶基因。通过纤维素作为惟一碳源的基本培养基来筛选生长
的转化子,表达子葡萄糖苷酶的克隆利用显色底物来鉴定

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