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本文标题："纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全"
新闻来源：未知 发布时间：2017-8-30 3:08:43 本站主页地址：http://www.jiance17.com
纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全
纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全，因此有必要通
过基因工程手段来制造一种具有更有效的纤维素酶活性的微生物：
为此．从原核生物和真核生物中分离出编码纤维素酶活性中具有不
同酶功能的基因。
通过下列简单而有效的技术可以克隆原核生物内切葡聚糖酶基
因。
①在大肠杆菌中构建纤溶性原核生物的DNA基因库，宿主菌在
加有选择抗生素固体培养基上过夜培养。
②菌落在含有羧甲基纤维素(CMC．一种可溶的纤维素衍生物)
的琼脂上生长。平板37℃培养几个小时内，在合成和分泌内切葡聚
糖酶菌落近处的羧甲基纤维素分子将被部分消化。合成非分泌型内
切葡聚糖的转化子不能分解底物，这是因为这些底物体积太大，不
能进入细胞。
③消化的CMC区域先用对细菌无毒的刚果红染料浸泡，冉用NaC
l冲洗。刚果红选择性吸附于高分子量的纤维素链中，显示出红色
；相对而言．它时小分子量的多糖黏附性差而显黄色。NaCl处理使
染料的结合更加稳定，如果细菌菌落产生一种分泌型的内切葡聚糖
酶，它的周围会产生一个黄晕环；没有被降解的CMC作为背景．呈
红色
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