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本文标题："GFP荧光和细胞活力分析图像显微镜的应用"
新闻来源：未知 发布时间：2017-8-14 20:20:46 本站主页地址：http://www.jiance17.com
GFP荧光和细胞活力分析图像显微镜的应用
GFP荧光和细胞活力
采用GFP对细菌标记已成为一个普通的方法，然而一个棘手的
问题却很少引起人们的注意，即GFP及其变种能否指示细胞活力。
也就是，在显微镜下观察到的所有发出荧光的GFP标记细胞是否都
可以认为是活细胞?Lowder等报告说，Pseudomonas刀uo-rescens的
死亡细胞与GFP从细胞泄露之间存在很强的相关性。大多数死细胞(
活力染色法)无GFP荧光，有小比例的细胞虽然死亡但仍具有绿色荧
光[40]。我们将GFP标记S. enterica细胞经过高温、干燥或次氯酸
钙等致死因素处理后也得到r相似的研究结果[41]。因此，GFP作为
活细胞内稳定的荧光物质会因细菌细胞死亡而迅速消失。但是，因
为少数荧光细胞的生理状态不清楚，所以在采用GFP标记法分析细
胞活力时，最好是再采用另外一种方法来对结果进行确认。26.3.3
.4细菌生理的其他荧光指示剂
尽管很多研究用荧光物质作为细菌呼吸或酶活性指示标记来研
究水生环境下具有代谢活性的细菌的检测问题[42,43)，但这些荧
光物质很少用于植物上细菌的活性研究。类似地，通过PH荧光探针
【如5一(和6一)梭基荧光素、BCECF, SNAFL, SNARF] [42.43]的荧
光比率成像和通过GFP[46]可以在单细胞水平上测定细菌的胞内pH
，但是还不能对植物上细菌的pH进行原位测定。随着人们对鲜切果
蔬上细菌酸胁迫存活的日益关注，类似研究手段将被证明是非常必
要的。此外，在抗微生物研究中荧光探针结合流式细胞仪得到了1
‘泛的应用。荧光探针技术和显微镜技术已成功用在去污染剂对植
物上人和植物病原菌的定量影响研究中。
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