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酶解制备染色体样品1.用解剖刀切下固定好的根尖。2.除去
所有坚硬的根冠。3.每个经Veetabond处理过的载玻片上放1—3个
根尖,滴一滴柠檬酸缓冲液。
4.用滤纸条吸掉缓冲液,加上一滴酶混合液不要加盖玻片。
5.将载玻片放人湿润温箱。37℃最长可达2h。
6.小心地用一个巴斯德吸出管或者微量移液器吸掉酶液(这时
的根会非常软),
在解剖镜下监控这一过程。
7.加1滴45%乙酸。根应解离。如果有必要,可以轻轻地将根
拉开。
8.在液滴上加上准备好的盖玻片。
9.用低倍(X10)相差物镜观察细胞。如果有必要,可以轻敲盖
玻片,直到根解
离为单个细胞。预处理可以改善染色体形态特征,使有丝分裂
同步并积累分裂中期。低温可以促使染色体收缩而改善大染色体(
例如,洋葱A///umcepa,蚕豆V/c/a/06e)的形态特征。在室
温条件下,不经预处理或只进行短时间预处理时,往往是小染色体
(例如,菜豆Phaseolus)反应较好。当第一次对某个植物种尝试不
同的预处理条件时,可以在不同的时间间隔取根尖样品进行检查。
以获得最佳的保温时间,对于原生质体悬浮液而言,还有另外的预
处理方法
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