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在各种情况下,都必须小心避免柱对样品的过载,否则将会出
现不规则的分离。加样的溶剂体积愈小愈好,因为在分离开始时给
出了一个紧密的样品带。另外,为了防止异常的吸附作用,样品在
加入前必须脱盐。
洗脱
在整个分离过程中,洗脱液通过柱时保持稳定的流速是
十分重要的,最简单的方法是通过重力输入。流速可以通过
调节“操作压”来控制,“操作压”相当于在柱上部的贮液瓶中
溶剂的水平和柱出水口位置的水平之差。一个普通开口的贮
液瓶不是很满意的,因为在实验过程中随着溶剂进入柱内,贮
液瓶中溶剂的水平下降,操作压也随着下降。
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