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本文标题："酚细胞裂解物的萃取是DNA提取的最早技术之一"
新闻来源：未知 发布时间：2017-7-4 0:27:04 本站主页地址：http://www.jiance17.com
酚细胞裂解物的萃取是DNA提取的最早技术之一
核酸的分离
在细胞裂解及核酸酶灭活之后，细胞碎片可通过过滤和I沉淀
的方法去除，但残留在溶液中的其他小分子和蛋白必须与核酸分离
。．目前常州的几种核酸提纯的方法包括萃取法、沉淀法、膜滤法
、色谱法、吸附纯化法以及电泳法，有时要同时应用多种提纯方法
以得到所需纯度的核酸二核酸提纯的困难之处在于去除与目标核酸
具有相似理化性质的物质，经研究这类物质包括脂多糖、RNA或者
线粒体DNA：大部分基因组DNA在裂解过程中变性沉淀，所以在后续
的步骤中需要去除大量的RNA和蛋白质在非分析类的应用中，核酸
的分离提纯方法同样非常重要，如基因治疗以及培养产药质粒，这
些方法都有类似的步骤：从宿主细胞中分离质粒，然后进行净化、
富集，最后提纯质粒，
溶剂萃取沉淀法
使用酚进行细胞裂解物的萃取是DNA提取的最早技术之一，在第
六、七章中已做陈述。悬液中的单细胞经过去垢剂处理后，再加入
蛋白酶以水解其中的蛋白分子。非核酸成分萃取到酚一氯有机溶剂
层中，而核酸分子则残留在水相中。分离水相并加入两倍体积的异
丙醇，相对分子质量大的核酸会形成白色细丝状沉淀，然后使用不
含DNA酶的核糖核酸酶(RNA酶)去除RNA。重复上述步骤，加入蛋白
酶、苯酚萃取、异丙醇进行二次处理，沉淀后加热煮沸或者离心样
品，并用乙醇洗两遍分离纯DNA，即可得到纯净白色丝状的DNA
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