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本文标题:"复杂网状物沉淀质粒DNA和小颗粒实验显微镜"

新闻来源:未知 发布时间:2017-7-3 19:08:29 本站主页地址:http://www.jiance17.com

复杂网状物沉淀质粒DNA和小颗粒实验显微镜

    碱性表面活性剂用于质粒DNA的处理,碱性pH值可以使染色体D
NA不可逆地变性,而质粒则为可逆变性,随后加入合适的试剂使溶
液变为中性。在pH值为中性时,质粒DNA能复性并留在溶液中,而
染色体DNA则会与蛋白和细胞碎片等其他物质形成复杂的网状物沉
淀,沉淀物絮凝并在1~2小时内成为多孔胶,多孔胶缓慢上浮至
表面,溶液中剩余质粒DNA和小颗粒:

    尽管表面活性剂提供了一种快速而温和的细胞裂解方式,但某
些表面活性剂即使在低浓度下仍会影响PCR过程下纯化过程中没有
被除去的残留表面活性剂会与DNA一起被洗脱,因此,在PCR之前必
须先清除表面活性剂。

    电穿孔
    在强电场下使细胞破裂的方法叫电穿孔。在这种状态下,细胞
膜会发生剧烈的改变而变得具有呵渗透性。电穿孔的应用主要有细
胞电转化和通过吸收外源DNA或RNA进行外加电基冈转移(主要用于
植物、动物、细菌和酵母菌)。电场在细胞膜卜产生可渗透的小孔
,核酸就可以通过电渗或扩散导入。

    在电穿孔过程中产生的小孔可以立即被填上,然而如果电场足
够强.细胞膜就会产生不可逆的机械破坏

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