---
---
---
(点击查看产品报价)
由同源重组实现基因寻靶
在标准的遗传分析中,是筛选大量的突变的细胞或整个生物体以寻
找所希望的表现型,从而获得那种决定着所选定的表现型的基因突变。
遗传操作最终可以产生所研究的基因中只有一个突变的后代。这种策略
对于细菌、低等真核生物(酵母和线虫)以及无脊椎动物(果蝇)都很好用
,因为这些生物的寿命短,也有大量的遗传连锁图。然而,要研究哺乳
动物的遗传性状,如小鼠的,标准的遗传学方法就费时费力而且困难。
由于重组DNA技术以及可资利用的克隆的基因序列的出现,研究工作者
开始设计直接的方法来操作小鼠的基因组以发展研究人的遗传病的动物
模型。这种策略是反求遗传学的一种形式,其基础是能够利用小鼠的胚
胎干细胞系(ES细胞)在体外进行DNA操作而引起所选定的基因中发生专
一的突变。把这些已发生改变的胚细胞再引回到正常的小鼠胚中,就有
可能产生其中有某种种系突变的转基因动物。
小鼠的反求遗传学的分子基础是能够利用同源重组以得到所希望的
基因突变。早期的开拓性工作称为定向基因转移。随着酵母中同源重组
的成功,这两个小组,还有其他人,最终发现了鉴定宿主基因与外加DN
A之间已发生同源重组的ES细胞的方法。小鼠细胞中的定向基因转移决
定于选择一种能够鉴定稀有细胞的方案,这种细胞中已发生了所希望的
同源重组。
发展定向基因转移技术的初衷是建立动物模型,以便能够详细研究
人的特异的疾病可用同源重组法插入新霉素抗性基因以破坏原有基因。
在利用这种技术时,发育生物学家使之最优化了,他们把具有定向突变
的细胞再引入到小鼠中,于是被破坏的基因就会稳定地遗传下去。这种
技术利用的是小鼠的胚胎干(ES)细胞,这是由怀孕母鼠的胚泡得来的。
一旦分离出了突变的ES细胞的无性系,就将这些细胞注入第二个小鼠胚
胎中,于是这一团细胞就植入在假孕的母鼠体内进行发育。小鼠出生后
,它们既有定向基因转移的ES细胞,又有来自宿主胚的细胞。
所有资料用于交流学习之用,如有版权问题请联系,禁止复制,转载注明地址
上海光学仪器一厂-专业显微镜制造商 提供最合理的
显微镜价格