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本文标题："显微镜培养箱成像细胞的温度实验图像显微镜"
新闻来源：未知 发布时间：2017-3-14 1:41:44 本站主页地址：http://www.jiance17.com
显微镜培养箱成像细胞的温度实验图像显微镜
用括号中的任一仪器保持成像细胞的温度(例如，完全封闭的显微
镜培养箱，循环水浴温度控制器，独立控制的阶段加热器，热空气
对流元件)。注意：这些温度控制元件的效率和价格按照从前到后
依次递减。3．各种可用的荧光蛋白极大地降低了成像的硬件要求
。使用标准的激发源和滤过设备能捕获很多这些蛋白质。4．EGFP
和EYFP，作为最常用的绿色荧光蛋白，能在一定程度上抵抗光漂白
作用，但是在任何试验中都要考虑这种现象。应该尽可能地降低这
些激发力，以延长荧光标记物的寿命。5．通常尽可能地保持蛋白
质的低表达，因为很多哺乳动物表达质粒中所用的强启动子能引起
荧光蛋白过表达的级联放大效应，并且荧光蛋白的桶状结构可以使
其较弱[如水母(Aequoreavictoria)突变体]或者较强[如某些珊瑚
和异辐海葵(Disco一50maandHeteractiscrispa)突变体]地自我交
联。6．开始实验时，应考虑到整个研究的时间进程。如果实验进
程很快，成像的间隔时间应该很小或为零。在这种情况下，影像扫
描和影像收集也要迅速。由于信噪比会随所收集的光子数目的平方
根增加(即扫描时间越长，信噪比越好)，增加帧频通常可降低信噪
比。由于进程较慢的研究扫描时间更长，并且有更长的时间间隔，
因此可以减少这些限制。两种情况均应考虑整个激发时间以减少光
漂白效应。7．使用传统的荧光显微镜技术定位目的荧光细胞后，
首先调节焦距、激发水平和探测器的捕获能力，在较短的时间内扫
描细胞，探测器可以从感兴趣的焦平面获取足够的信号。要尽可能
快地完成这些步骤，以减轻甚至在实验开始前就开始的光漂白效应
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