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本文标题:"电泳分离得到的蛋白质能够直接通过凝胶染色显色"

新闻来源:未知 发布时间:2017-3-10 23:38:31 本站主页地址:http://www.jiance17.com

电泳分离得到的蛋白质能够直接通过凝胶染色显色

过程分别以电荷和分子大小为基础分离蛋白质,从而能够在单一的
双向凝胶中分辨几千种蛋白质。单元7.3中阐述了利用双向等电聚
焦/SDS-PAGE分离蛋白质的一些方法。除此之外,这一单元还介绍
了一种双向非还原/还原电泳的方法,即蛋白质在第一向非还原条
件下和第二向还原的条件下进行sD孓PAGE的分离。这一类型双向凝
胶电泳能够分析分子内含有二硫键的多种蛋白质复合物。这两类双
向凝胶电泳既可作为分析,又可作为制备之用。为进一步分析或纯
化蛋白质,也可用单向IEF平板凝胶进行蛋白质的分离。
    聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的局限性是蛋白质的分子质量
要小于300 000Da。大的蛋白质或多种蛋白质复合物的电泳分离需
要使用其他的凝胶基质。琼脂糖是比较合适的基质,它普遍用于DN
A的分离。利用琼脂糖凝胶电泳分离蛋白质的方法。除了能够分离
非常大的蛋白质,这些方法还能分析多聚物或聚合体。虽然这些过
程也能够通过蔗糖梯度离心(单元6.2)或凝胶过滤(单元6.3)进行
分析,但是琼脂糖凝胶电泳更便于对大量的样品进行分析。
    电泳分离得到的蛋白质能够直接通过凝胶染色显色。对四种基
于不同原则的对凝胶中的蛋白质染色的方法进行了介绍。这些染色
过程包括考马斯亮蓝染色、银染、SYPR0 ruby染色和锌染。这一节
介绍了基本的实验方法并对如何选择高效的方法提供了指导。

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