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样品的处理
昆虫体壁尚未生长出菌丝之前的新鲜虫尸可用5%次氯酸钠或0.1
%的升汞溶液进行表面消毒。首先将病虫浸入95%的乙醇中.立即取出
在火焰上烧去虫毛和鳞片,然后浸入70%的乙醇中3—4秒,去掉虫尸表
面的气泡,使体壁充分润湿.然后浸入消毒液(次氯酸钠或升汞)中,消
毒处理1分钟,取出虫尸,用灭菌水冲洗3—4次。但小型昆虫虫尸则不
宜进行表面消毒。
经表面消毒的虫尸可立即分离,也可置于载片上蒋放入无菌培养皿
内保湿培养(皿底放湿润滤纸),待生长出分生孢子梗和分生孢子后再行
分离。昆虫体壁已形成大量分生孢子的虫尸,不再适宜进行表面消毒,
这样的分离材料,可以直接向培养基上抖落或用分生孢子划线分离。
分离操作
经表面消毒的虫尸可以立即置于无菌盘内解剖,取小块感病组织,
接入有适宜培养基的无菌培养皿内(组织分离法)。
被严重污染的虫尸分离病原真菌较困难,可反复用划线分离法直到
纯化为止。也可取虫尸体表的孢子用无菌水稀释后滴在培养基上,再用
玻璃刮铲涂抹分散开或用抑制细菌和其他非目标真菌的选择性培养基进
行分离。
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