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重组体分子克隆的选择或筛选。
单个基因仅占染色体DNA分子总量极其微小的比例,必须经过扩增
,才有可能分离到特定含目的基因的DNA片段,因此需要先构建基因文
库(gene library),或者叫做DNA文库,它们由来自染色体基因组DNA的
全部DNA片段组成。
用于基因克隆的DNA材料的来源,主要是从特定组织提取的染色体
基因组DNA或mRNA反转录成的eDNA。究竟选用何种DNA材料,取决于所解
决的问题的特殊性。如果所研究的目标是要弄清楚一种蛋白质的氨基酸
顺序,则可以根据克隆的eDNA序列直接推导出来。如果研究的是控制基
因表达活动的调控序列,或是在mRNA分子中不存在的某种特定序列,则
应该从染色体基因组DNA中获得。由此可见,用于基因克隆的DNA材料选
择是一个重要的问题,它决定了究竟采用eDNA克隆还是基因组克隆。
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