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就是把适当稀释度的严甲烷菌富集培养物,在无氧条件下接入已融
化预还原灭菌琼脂培养基的厌氧试管中,然后将它在滚管机上均匀
滚动,使含菌培养基均匀地分布在试管内壁上。经培养后,试管内
壁上产生在解剖镜下清晰可见的单菌落。仔细挑取后,再用相同方
法纯化几次,即可获得产甲烷菌的纯培养物。
还可采用厌氧手套箱技术(anaerobic 40ve chamber)分离甲烷
细菌。在厌氧手套箱内,装有超低氧室,在其中采用常规法进行玻
璃或塑料培养皿的划线分离培养,也能获得许多产甲烷细菌纯培养
物。运用厌氧手套箱时,对于各种培养基制备、平板倾倒和其它培
养基操作,要特别注意保证厌氧条件。一旦制备好培养基后,必须
把它们放在厌氧手套箱中的厌氧条件下,并且把它们在厌氧手套箱
中厌氧放置至少48h。各种划线培养和接种均须在厌氧手套箱内进
行,并放在超低氧室中培养。如果打算在厌氧手套箱外培养,则不
论何时在培养物移出手套箱之际,都必须把培养物放在带有紧密密
封塞的厌氧玻璃瓶或金属罐中进行转移。这种培养产甲烷细菌方法
,对于进行遗传学研究有和,因为遗传学研究需要处理和观察大量
平板菌落生长。
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