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贴壁细胞培养过程-带微载体颗粒的灌注培养
贴壁细胞培养过程
贴壁细胞培养的工业放大会遇到特殊问题。由于贴壁细胞系有
表面贴附要求,为了增加细胞密度,就要增加反应器的比表面积。
培养贴壁细胞的传统方法是滚瓶培养,多层板系统。现在,滚瓶培
养和多层板系统只限于使用在特殊的场合,如EPO生产、基因治疗
和疫苗生产。Unger等[30]模拟了滚瓶反应器中的流动和流体混合
,并在实验装置中用颗粒成像流速仪证实了理论结果。增加了垂直
摆动,改善了滚瓶系统中混合的速率和整体性。这个例子说明,即
使很完善的反应器系统,利用工程原理进行设计改进,仍有潜力可
挖。用于贴壁细胞培养的非传统生物反应器还有鼓泡塔反应器,组
合有径向流固定床的膜透析反应器和灌注填充床反应器。
培养贴壁细胞的最主要的生物反应器是在搅拌罐中的微载体悬
浮培养系统。微载体搅拌罐反应器的规模已达10000L,过程优化容
易,流加设计有弹性。由于技术原理相似,工业上更容易建立平台
技术。开发悬浮和贴壁培养的流加工艺时,原理和方法是一致的,
目标是减少废物积累和营养变异,建立高密度的细胞培养。
目前,贴壁培养工艺的主要研究热点是带微载体颗粒的灌注培
养。。的搅拌罐反应器中进行微载体灌注培
养,用CHO细胞生产单细胞克隆抑制因子。反应器中安装了内部旋
转过滤器,截留细胞/微载体,运行了2个月。这个过程的重要特
征是能够直接接种进行微载体培养,无需细胞消化。主要参数都容
易地从3L放大到15L规模
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