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电镜样品的染色在电镜下观察样品,不能像在光学显微镜下利用
各种不同的染色技术来分辨不同组织及其组分,只能根据样品不同
部位的反差来观察。一般决定反差的两个主要因素是对象的电子散
射能力及其厚度:生物对象所含有的碳、氢、氧、氮的散射能力很
低,不能使它们产生适当的反差,而载膜散射电f的能力与对象的
差别不大,因此很难区分结构的细节;象噬菌体和病毒一类生物体
的厚度较小,因而反差也特别低。为了增加某种组分的反差,在制
备样品中加人选定的重金属沉积或附着在一定部位,使与其周同和
背景造成明显的反差。从而能观察到对象的结构和细节,这就是电
子染色或电镜样品的染色。
常用的染色技术有正染色和负染色两种。
利用重金属盐类能与某些生物物质发生特异的作用,某些结构
对电f的透过能力减低,与样品的背景浅色相比显示暗包,从而加
强了有关结构的反差,这种技术称作正染。具体操作基本如下:取
一滴提纯样品的悬液用甲醛先行固定,或不先行固定,放置在覆有
火棉胶膜的载网上,经短时间后用水或悬浮材料的溶液洗涤,然后
把载网浸入重金属盐溶液,再用蒸馏水洗涤,移置存滤纸片卜^去
除多余的液体∞引。这样制备的样品在观察时,由于溶液中的重金
属离f与所观察材料的特定物质相互作用,增强了电r散射。
负染技术也是利用重金属增加反差的一一种手段,在喑的背景
中可以观察到浅色的对象和它们的结构细节。常
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