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荚膜是围在细菌细胞外面一层粘液性多糖类物质
了解细菌菌落的特征。
基本原理
荚膜是包围在某些细菌细胞外面的一层粘液性多糖类物质。荚
膜与染料结合力很弱,不易着色,故常用衬托染色法,即将菌体和
背景着色,而把不着色且透明的荚膜衬托出来。由于荚膜很薄,且
含大量水分,因此,制片时一般不用热固定。
细菌的大小,可在
显微镜下用测微尺进行测量。目镜测微尺是
一块圆形玻片,在中央刻有5mm长的等分线。测量时,将其放在显
微镜接目镜的隔板上。由于不同显微镜的放大倍数不同,故目镜测
微尺每格实际代表的长度随显微镜的放大倍数不同而异,在使用前
须用镜台测微尺校正,以求得一定接物镜及接目镜等光学系统下,
目镜测微尺每格实际测量时的长度。镜台测微尺是中央部分刻有精
确等分线的载玻片。一般将1毫米等分为100格,每格等于0.01mm(
10微米)。它是专用于校正目镜测微尺每格长度的。
不同种类的细菌菌落,在其形态、大小、色泽、透明度、粘稠
度、致密度以及边缘情况等方面都有所差异,菌落形态特征是区分
和鉴别细菌种类的重要依据之一。这种方法简便快速,特别在菌种
筛选和辨认等方面应用广泛。
三、器材
目镜测微尺镜台测微尺显微镜放大镜等
黑色素溶液95%酒精石炭酸复红染色液
圆褐固氮菌枯草杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌的平板菌落枯草
杆菌金黄色葡萄球菌染色玻片标本
四、实验步骤
1. 几种细菌菌落形态的观察用放大镜观察圆褐固氮菌。金黄
色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌菌落的大小、形态、色泽,透明
度、粘稠度以及边缘情况。
2. 荚膜染色
(1)在干净的载玻片中央,滴加蒸馏水少许。
(2)按无菌操作要求用接种环挑取培养2—3天的圆褐固氮菌制
成涂片,晾干(不可用火焰烘干)。
(3)加95%酒精1滴固定(不可加热固定)。(4)加石炭酸复红染
液染色3—4分钟,水洗。
(5)滴l滴黑素于载玻片一端,另取一块边缘光滑的载玻片+
与黑素接触,再以匀速向涂片推动,通过涂片使成一均匀的薄层
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