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植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后,可以通
过组织化学(显微化学)染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜
下得以显示,从而了解这些物质在植物的组织、细胞内的空间分布
。用于组织化学研究的切片,根据研究对象和所要检测的化学物质
的不同,可采用石蜡切片,有时要求新鲜材料采用徒手切片或冰冻
切片。在植物组织切片过程中恰当地运用一些简单的组织化学染色
方法,一方面可以确定细胞壁及细胞后含物的化学性质,另一方面
也有利于分辨组织和细胞的结构。
显示细胞壁化学组成的方法
(1)纤维素:植物细胞的细胞壁中最主要的成分是纤维素。常
用的显色方法为碘一硫酸法:取1%的碘一碘化钾溶液滴加在材料
上,再加1滴66.5%的硫酸,纤维素细胞壁与碘和硫酸作用而变成
蓝色。在细胞中,纤维素的成分愈多和其他后来参加组成细胞壁的
成分愈少,则蓝色愈明显;在次生壁中,纤维素已为木质素等覆盖
j不变蓝色。
(2)木质素:木质素是以苯丙烷为结构单元通过醚键一碳键彼
此连接成具有三维空间结构的高聚物。因为植物细胞壁上的木质都
成复合的状态,木质素的显微化学方法虽然很多,但一般只能示知
其存在的可能性而已。间苯三酚反应是植物显微化学中确定木质化
的最常用和最简单方法:切片先用l滴盐酸浸透,然后,滴上1滴5
%~10%的间苯三酚酒精溶液,木质化细胞壁可现出樱红色或紫红
色(因颜色会慢慢褪去而不宜制作永久制片)。染色稍为稳固的方法
为硫酸苯胺(或盐酸苯胺)法:在切片上滴上1滴硫酸苯胺试剂(硫酸
苯胺19,蒸馏水70mL,95%酒精30mL,硫酸30mL),木质化的细胞
壁现出鲜黄色或姜黄色,可制成保持期稍久的永久制片。
(3)栓质和角质:栓质和角质都是特种高分子饱和或不饱和脂
肪酸的衍生物。用碘一硫酸或碘一氯化锌法染色,栓质和角质都可
显黄色或浅褐色,但木质、半纤维素等成分也被染成同样的颜色。
用苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染色,栓质和角质呈现橘红色反应,不过这种
反应也并非栓质和角质的特异性反应。
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