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以甲基营养型酵母、毕赤酵母菌(Pichia pastoriS)和多形汉
逊酵母(Hansenula poly—morpha)作为宿主来生产蛋白质是非常具
有吸引力的。这些酵母能够以甲醇作为碳源和能源进行生长。甲醇
也是AOX 1启动子的诱导物,该启动子通常被用于控制目标蛋白的
表达。这些酵母也能达到非常高的细胞浓度(例如高至1009/L)。
对于一些具有高表达水平的蛋白质来说,由于细胞浓度可以达到很
高,这些酵母培养物的体积生产率要比大肠杆菌高。这些宿主的蛋
白质折叠和分泌通常也优于大肠杆菌。这些酵母能够进行简单的糖
基化修饰,与酿酒酵母相比,过度糖基化的程度要小一些。像许多
其他宿主系统一样,它们的效果通常和目标蛋白有密切的关系。甲
基营养型酵母的缺点是由于高的细胞浓度和代谢速度,会产生大量
的必须被移走的代谢热,另外还需要大量的氧气。由于甲醇既是生
长底物又是诱导物,在维持细胞活力的同时对蛋白质表达进行有效
诱导,这需要非常好的过程控制。此外,高浓度的甲醇具有抑制作
用(即底物抑制),这也需要很好的过程控制(以精确控制甲醇浓度)
。大反应器的生产放大通常是非常具有挑战性的,这是因为在具有
较长的混合时间的大反应器中进行热量移除、供氧和过程控制通常
要困难得多。甲醇也是易燃的,处理大量的甲醇涉及安全问题。虽
然如此,这些甲基营养型酵母正变得日益重要。
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