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一旦种植了原代细胞,细胞会处于一个高度营养的条件下,
贴附到底物上,但是,绝大多数细胞会死亡或发生分化。培养2~3
d后,增殖性细胞会离开组织培养皿底部,聚集成神经球样的细胞
团,通常培养48h可以观察到。这些聚集的细胞团不应被误认为原
代神经球。聚集细胞团块的数量直接与培养基中细胞碎片和死细胞
数量有关。通常情况下,这些假神经球是很大的,但是它们是由小
的、变黑的、形状不规则的细胞组成的。
pH诱导法
将相对接合型的两种纯系培养液各1 mL混合于小培养皿中,然
后分别向混合培养液中加入新鲜配制的一定pH梯度的培养液2 mL。
在20~25℃下培养。将小培养皿直接置于体视显微镜下观察。
测定培养温度,准确记录出现接合生殖相的pH值、接合生殖率
最高时的pH值、接合生殖相不再出现时的pH值,寻找不同pH值下接
合生殖率的变化规律,分析变化原因。通过计算接合生殖率找出诱
导接合生殖的最适pH值。
每个组合设3个重复,需同学们协作完成。
温度诱导法
先通过智能恒温培养箱找出致死大草履虫的最高温度、最低温
度,以确定大草履虫存活的温度范围。
将相对接合型的两种纯系培养液和新鲜培养液各l mL混合于小
培养皿中,然后分别放入恒温培养箱中培养,在大草履虫存活的温
度范围内,以1℃为梯度改变培养温度。2 h后,每隔10 min将小培
养皿直接置于体视显微镜下观察,以判断是否出现接合生殖相。每
个组合设3个重复。
测定培养液的pH值,准确记录开始出现接合生殖相的温度、接
合生殖率最高时的温度、接合生殖相不再出现时的温度,寻找不同
温度下接合生殖率的变化规律,分析变化原因。依据接合生殖率找
出诱导接合生殖的最适温度。
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