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本文标题:"扫描电子显微镜能观察细胞的三维空间结构"

新闻来源:未知 发布时间:2016-11-15 11:43:38 本站主页地址:http://www.jiance17.com

扫描电子显微镜能观察细胞的三维空间结构
  

  扫描电镜观察

  透射电镜仅能研究细胞的一个薄切面,扫描电镜则能观察细胞的三
维空间结构,对研究细胞表面结构及染色体亚微结构都有用。

  1.培养细胞的样品处理:生长于盖玻片上的细胞用Palade缓冲液
或其它平衡盐清洗2~3次。培养瓶中的细胞用橡皮刮刮下,或单纯滴管
吹打,也可用胰酶消化。但胰酶消化后,细胞表面结构有改变。收集细
胞后用平衡盐洗涤。

  2,沿管壁徐徐加入0,5呖戊二醛,约2~4m1,边加边摇,以防止
细胞聚集成团,并置4℃固定半小时。

  3.加筝渗磷酸盐缓冲液约10~15m1,洗涤,低速离心后弃去上清
液。余下适量的细胞悬液。备用。

  4.用等渗磷酸缓冲液配制的o.1g6多聚赖氨酸(分子量60,000~1
00,000)溶液滴在4mmX6mm大小洗净烘干的盖玻片上,室温下静置5~lo
min,用滤纸从边缘吸去多余的液体。    ,

  5.当盖玻片尚未完全千时,将上述备用的细胞悬液滴在涂有多聚
赖氨酸阳离子膜的玻片上,静置5—30mia,用滤纸吸去多余的液体。

  6,将附有细胞的玻片放入1呖戊二醛4℃固定山.

  7,磷酸缓冲液从玻片边缘滴加,洗涤数次后,固定1h(4~C)。

  8.磷酸缓冲液洗涤,梯度丙酮脱水,入醋酸异戊酌。待干燥处理

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