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酶反应最适温度一般为37℃-超微结构实验
孵育液要避免严重的高渗和低渗。配制孵育液时各物质要充分
溶解。否则,各种成分的浓度会发生改变。溶解各种成分的顺序,
一般按照已定的顺序进行。孵育反应适合于在振荡式恒温水浴箱中
进行,孵育过程中不断振荡,使组织切片反应均匀完全,孵育液也
易渗入组织内部中。没有振荡式恒温水浴箱时,在恒温水浴箱中人
工振荡孵育液。酶反应最适温度一般为37℃,少数酶最适反应温度
在20'C或高于37℃。孵育时间和温度要根据不同的酶和组织通过实
验确定。反应结束后要用配制孵育液的缓冲液或其它合适缓冲液或
生理盐水等漂洗组织,一般换洗2—3次,每次l一5min(以下简称漂
洗)。可在0.05—0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液中短时保存(4℃)
。漂洗的目的是去除组织中剩余的各种孵育液试剂,特别是多余的
捕捉剂。一般酶反应漂洗后最好及时进行后固定,如那些最终反应
产物为俄黑的酶反应,若不及时用织酸处理,反应产物会扩散或消
退。少数酶反应:(如铅法、铈法等)可在缓冲液内保存过夜后再进
行后固定。用饿酸后固定之前,对于那些反应前未充分固定(或未
固定)的样品,可在酶反应后用2%戊二醛再固定1h,这时的固定不
会影响酶的活性,却有利于超微结构的保存。
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