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核酸定量测定一般采用流式细胞仪,显微分光光度计
核酸定量分析方法
核酸定量测定目前一般采用流式细胞仪,显微分光光度计、荧光
显微分光光度计、体视学方法、图象分析仪等仪器和方法进行测量
计算,也有采用银染方法、积分微显微测密术及其它一些细胞光度
测量方法。测量的参数最常用的是DNA的含量,以二倍体(2c)为标
准,测定的DNA含量以单倍体(1c)、二倍体(2c)、四倍体(40)、八
倍体(8c)及非整倍体表示,以DNA直方图显示。用流式细胞仪等测
量后还可通过公式计算出DNA指数、RNA指数和蛋白质指数(参见第4
章)。用图象分析仪和体视学方法还可测量计算出核酸细胞化学反
应后的反应产物灰度、光密度参数。阳性细胞核的几何参数(参见
第4章),以定量表述核酸细胞化学反应的程度和核酸含量或相对含
量。用银染和放射自显影等方法可直接计数银颗粒。电镜下的银染
阳性反应产物还可用x射线微区元素分析方法测定银元素的含量,
以定量反映Ag—NOR的反应强度。总之,核酸细胞化学的定量方法
和手段较多,虽然有些方法实际上仅是半定量或相对定量,但已从
定性跃入到定量测量阶段,这些定量细胞化学方法已在生物医学不
同领域的研究和临床诊断治疗中广泛应用,起到了很好的效果。
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