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本文标题:"酶即不易失活,磷酸盐缓冲液最接近于生理液体"

新闻来源:未知 发布时间:2016-8-30 20:58:48 本站主页地址:http://www.jiance17.com

酶即不易失活,磷酸盐缓冲液最接近于生理液体



当细胞破裂,将酶从其中分离出来以后,这些条件都不存在了,于
是在人造的缓冲液中,就面临氧化、变性、以及活性部位遭受外界
因子的破坏。此外,酶也很容易为失去控制的蛋白酶所分解。为了
保持酶的活性,举凡缓冲液的浓度、pH、温度、辅因子、活性稳定
剂等种种因素都需加以考虑,但原则上以尽量能恢复到细胞中原来
的天然环境为准则。
    缓冲液和pH的控制  以适当的缓冲液来控制pH是保持酶活性的
最基本条件。细胞里的pH一般都在6—8之间,所以如能把pH维持在
这个范围之内,酶即不易失活。磷酸盐缓冲液最接近于体内的生理
液体状态,所以最为常用。但是带有多个负电荷的磷酸根在浓度过
高时,有时对酶会发生抑制作用,这点要加以考虑。



    酶活性的测定与保持
    无论在分离酶的过程或酶被提纯以后,都要随时测定酶活性,
算出酶的比活性,用以观察分离过程中各步细节的效能,粗酶的取
舍,及贮存期酶质量的变化。酶活性的测定乃酶动力学在实际方面
的应用。酶在不适当的环境下极易失活,所以如何才能保持酶的活
性长期不变,或缓慢地失活,是在分离酶时所必须解决的问题。
     影响酶活性测定的因素
    由酶的动力学研究。知道酶活性和底物、激活剂与抑制剂的浓
度、缓冲液的种类和浓度、pH、温度、以及酶本身的浓度都有关系
。通常都尽量在最适当的条件下测量酶的活性,以求达到最大的酶
反应速度
      不过限于种种原因,如底物的溶解度太低,或售价太高,或
有时尚需要其他连锁的酶反应来辅助酶活性的测定,则这时必须对
酶活性测定的条件作适当的修正,方符合实际的需要。
   底物浓度、激活剂及抑制剂  酶反应在底物的浓度达到最高的
合理浓度时会得到它最大的活性。

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