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组织和细胞匀浆的制备
组织的匀浆引起了形态学和生物化学细微部分的丧失。
如果匀浆是打算作为从一个组织中分离一种化合物的初步阶
段,那么这可能是不重要的。但是,如果要研究代谢过程,那
就必须尽可能地保持组织的形态学和生物化学的完整性。很
遗憾的是,匀浆技术在组织分级分离研究中的使用仍然是凭
经验的。匀浆过程是为了打碎组织和打开细胞的边界(细胞
壁或膜)以释放细胞内含物。为了达到这个目的,可以使用很
多不同的设备和技术,但是它们的操作原理始终没有被很好
地认识。在缺乏满意的理论基础和方法的适当标准化的情况
下,匀浆更多地是属于一种艺术而不是一种科学。鉴于不同
的组织在某些细胞器的脆性以及细胞和组织对裂解的抗性这
二方面有很大的区别,因此对每一种材料的匀浆提出了不同
的问题,这些问题只能通过反复的试验来解决。这种技术的
主要贡献是作为分离细胞成分的初步阶段,因此可以用来推
断代谢过程的细胞内定位。匀浆本身也能直接用于对加入化
合物的吸收和代谢的研究。如果,化合物进人完整细胞由于
膜的通透性而遇到困难时,这是一个很有用的技术o
悬浮介质的选择
匀浆对悬浮组织的介质没有一个明确的选择方法。查阅
文献可以得到一些指导,但是,最终还是要在各种介质上进行
试验的基础上来选择。
通常用蔗糖使介质具有足够的渗透压,以防止颗粒膨胀
和破裂。如果蔗糖干扰酶的鉴定,有时可以用甘露醇来代替。
为了保存颗粒的完整性和防止酶的失活,有很多特殊的配方。
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