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免疫荧光抗体技术的基本原理
抗体免疫球蛋白可以与荧光色素相结合,而不失其抗体的免
疫活性,称为荧光抗体。免疫荧光技术即是用荧光抗体作为特异
性试剂,由以下几种方法在荧光
显微镜下检查组织细胞内的相应
抗原或抗体。
2.间接法荧光抗体间接染色法可以间接证明组织中的抗
原,又能显示细胞内或血清中韵未知抗体。
(1)抗原间接显示法用间接法显示抗原,须用两种不同的
免疫血清,一种免疫血清(抗体I)不标记,另一种免疫血清
(抗体Ⅱ)用荧光色素标记。首先用未标记的抗体与标本内相应
的抗原作用,使成抗原抗体结合物。然后以标记荧光色素的抗体
II(兔抗人或羊抗兔球蛋白荧光抗体)染色,即成为发荧光的抗
原一抗体一抗抗体结合物,以间接方法显示标本内的抗原成分,这
种方法称为双层染色法。
国细胞内抗体间接显示法细胞内抗体间接显示法是用相
应的特异性抗原处理标本,使其与细胞内的抗体结合。洗去多余
的抗原成分后再用荧光标记的相应抗体作用,荧光抗体与巴知细
胞内抗体相结合的抗原结合。即中层的抗原一方面与标本内的抗
体结合,一方面与表层的荧光标记抗体结合,这种染色法又称夹
层染色法。
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