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相差或DIC
显微镜经常使样品的对比度最大化提高分辨率
可存活微生物通常是借助湿法安装(wet mount)来观察。在这里,细胞悬
浮在水、盐水或其他液体媒质中,液体维持生存力并允许细胞移动。湿法安装可
以在一个有盖玻片的简单载玻片或是有特殊构造的载玻片上完成。例如,在后一
种情况中,含有样品的液滴可以放置在玻璃盖玻片上,然后将凹面朝下的载玻片
放在盖玻片上。倒置盖玻片和载玻片,液滴会悬挂在盖玻片上。因为凹面朝下,
液滴不会受载玻片的影响,这样会产生悬滴(hanging drop)。悬滴载玻片在监测
细菌游动性方面很有用。相差或DIC显微镜经常使用湿法安装来使样品的对比
度最大化。
尽管在湿法安装中可以确定形态,但这一般是比较困难的,这是因为缺少样
品和周围媒介之间的对比和细节,同时也因为微生物是运动的。另外一种观察形
态和其它内部结构的方法是在载玻片中将样品固定、染色。这样观察到的仅是非
存活生物,这是因为固定和染色的过程会杀死生物。细胞的固定是在载玻片上将
细胞的液态悬浮物涂抹成薄膜,在空气中晾干,制成涂片(smear)。然后将涂片
在火上轻微加热几秒钟使其固定在载玻片上。用能看见细胞细节的染料将涂片染
色。有许多不同的染料供选择,但通常将它们分为带正电荷的碱性染料(basic
dye)和带负电荷的酸性染料(acidic dye)。带负电荷的细胞成分如核酸吸引碱性
染料,那些带正电荷的如一些细胞膜成分,吸引酸性染料。
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