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使用分光光度计测量酵母菌是不适用的-显微常识
为了保持培养结果稳定,通常做法多半是使试管倾斜,通过
暴露液体的最大表面来增加通气盘,而且天天用手振动它。如果
不停地摇动或转动试管也能达到充分的通气和较好的混合。
所以,该试管方法较快且好,已经标准化,而且结果也是比较可靠
通常用肉眼来确定菌的生长,是把阴性反应管与阳性反应管
进行对照。有的时候,在每一管子的后面衬以有黑线的卡片,观
察已生长的酵母菌的混浊程度,把所呈现的混浊程度作为不同生
长状况的标准。而用比色测定菌体生长会更好一些,因为它能得
出客观的测量结果(它能依次折合出干重来)。不过,对于具有
絮凝作用的酵母菌是不适用的。这些试验虽然能够使用分光光度
计侧量,但比浊法通常对于分类学的生长试验更方便些。用比浊
法测量散射的光线适合于测定试管里的生长,但在不规则的试管
中则很不灵敏。对于大多数鉴定来说,虽然经常培养测定到4
周,但上述方法对于测定生长一周以上的酵母菌是无效的。
平板影印培养法
把在“主”培养皿内培养基表面生长的高达25个酵母菌落复
印(即同时接种)在具有不同碳源的另一些培养皿内。复印模用
平绒或棉花垫制做。
用一根直的金属丝把25株正活泼生长着的菌接种到一个培养
皿内的营养琼脂培养荃(如,麦芽汁一酵母膏一偷萄糖一蛋白
陈)的表面,这些培养物在琼脂平板上排列成一定的样式,让这
些酵母菌过夜生长,长出分离的小菌落。每个培养皿必须有一个
标记来定向。上述试验培养皿,每一个都含有氮源基础培养基,
约25mM碳源(阴性对照管没有)和2% (W/V)的水洗琼脂。
平绒布应包在铝箔中,进行高压蒸汽灭菌。准备一个圆柱形的木
棒,其直径正好放进培养皿的底部,把无菌的平绒布复盖在上
面。具体做法是:先用一个无菌的培养皿底盖压在木棒顶端的平
绒布上面,再用一根金属环或橡皮筋把平绒布固定住。
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