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通常使用甲醛和戊二醛对蛋白质进行固定,以防止其在脱水干燥和包埋过程中授出。
由于蛋白组分可以溶解部分糊化或变性淀粉,如果同时研究淀粉和蛋白时应注意这个特
点。将样品固定在乙醉一戊二醛溶液中,可以防止糖和更复杂的碳水化合物浸出,但同时
可能会使它们发生沉淀。在不需要精细地保护蛋白结构的情况下,将样品简单地固定在乙
醉中可以使多糖得以保留。但遗憾的是,在脱水干燥和包埋过程中,脂类保留程度比用四
氧化饿固定时少很多。长时间的固定处理(可能是几周)可以保留不饱和脂肪酸—固
定可以通过蒸气相与液态的固定剂相接触,但并不推荐使用这种方式。如前所述,使用四
氧化饿时需要有严格的防范措施。
通常情况下,采用树脂包埋可以获得比石蜡更薄的切片,尽管如此。对于大址的样品
常规检测时,人们更倾向于选择石蜡包埋方法。切片的厚度要根据研究需要进行调整,较
薄的切片可以较好地分辨样品细微特征,但在低放大倍数下,较厚的切片能产生良好反差
效果,而且易于染色。
如果需要检测冷冻样品,如冷冻甜点,样品的冷冻切片将被置于一个冷冻台上,并且
在仍是冷冻条件下在显微镜上检测。
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