---
---
---(点击查看产品报价)
本文标题："荧光强度的细胞分析用图像荧光显微镜"
新闻来源：未知 发布时间：2014-7-5 0:58:44 本站主页地址：http://www.jiance17.com
荧光强度的细胞分析用图像荧光显微镜
对大多数希望追踪一个特定蛋白质的研究者来说，使用FP需要将日的基因的
cDNA与FP构建成融合蛋白载体然后转化到宿主细胞或整个生物体中。与几平
所有的GFP变体和珊瑚来源的FP相比.EGFP作为融合蛋白效果最好。因此如果可
能的话，应对GFP(或者其他良好的衍生物如Emerald)进行预实验。在使用其他光
谱区的FP之前，首先利用GFP优化载体策略，从长远来看往往证明这是值得的。在
最好的情况下，新的GFP嵌合体及其他光谱区的衍生变体能使目标蛋白行使正常细胞
功能，同时FP作为标记探针报告蛋白结合位置。然而，这并不总是那么简单，研究人
员往往怀疑采用不同的FP融合载体策略是否能产生更好的效果。
似设宿主细胞是健康的，转染过程不会产生太多的创伤，那么FP工作中遇到的最
常见的问题是荧光信号太弱、聚集化、错误定位、融合蛋白无功能以及预期的荧光强
度被抑制。如果这些问题可以得到解决，研究者必须选择瞬时表达还是稳定表达，瞬
时转染的细胞表达水平差异很大。而稳定表达需采取更多的时间来选择稳定表达的细
胞群，但往往会产生更好的效果。通常首先考虑(并且更快)用组成性启动子瞬时表
达FP融合蛋白，然后选择低水平荧光强度的细胞，这些细胞的表达水平可能接近内源
状态而不影响细胞的正常功能。
然而构建稳定的细胞系能定见比较融合蛋白与
对应的内源蛋白的表达水平，是更安全的途径。或者也可通过诱导启动子来构建融合
表达载体能控制月的蛋自的表达水平。对于许多样品来说，可以在内源墓因插人FP,
构建插人内源表达的FP标记，这种方法在模式生物，如醉毋、线虫和小鼠中的应用越
来越广泛，而几是定量生物学实验的最好方法。
所有资料用于交流学习之用，如有版权问题请联系，禁止复制,转载注明地址
上海光学仪器一厂-专业显微镜制造商 提供最合理的显微镜价格
合作站点：http://www.sgaaa.com/显微镜百科
下一篇：酵母孢子细胞数计量用图像显微镜