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应用反差增强技术的显微镜
从显微镜的基本结构可知,无论从最简单的显微镜还是到最先进的显微镜,
光源、聚光镜、物镜、目镜是显微镜的四个最重要的部件。光源的适当排列
和保持科勒照明与聚光镜匹配可保证光强均匀地照射在样品上。对于显微镜而言,
仅仅获得均匀的照明光场是不够的,还需要尽可能多地收集与样品作用的光线。
使用显微镜明视野照明技术,图像中的反差是由样品各点依共光吸收的差异所
产生的,同时还与由光吸收物体所导致的衍射模式有关。如果显微镜明视野图
像质量不令人满意,那么可使用其他成像技术来提高显微镜图像的反差(contrast)
暗视野照明(dark-field illumination)是一种用来增强样品中吸收
或散射特征的反差的方法。暗视野照明光路的主要设计特点是设置了暗视
野聚光镜。
暗视野聚光镜是一种特殊的聚光镜,它的作用是依靠紧邻聚光镜的不透
光物来遮挡住中间的大部分直射半线,形成一中空的光锥体,以一定的
倾斜角照射到样品上,因此能够进入物镜成像的主要是由样品所敞射的
光线。由于暗视场照明技术改变了样品的吸收或散射,从而有益于反差
的增强。
暗视野照明方式最适合观察微粒,可用于观察活细胞的结构以及
细胞内微粒的运动状态。
但暗视野照明方式不适合观察染色的样品,因为染色后减少了
样品和周围介质时间折射率的差别.将使暗视野的图像质量下降。
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