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固定方法
材料要用新鲜的活组织,用刀片切成小块,立即投入适当的固定液内固定。组织的大
小因材料而不同,组织切得小,效果比较好。一般方块状的组织,每边的大小以不超过2
3mm为宜。组织切成的大小和形状,要根据材料而定,一方面要注意将来操作上的方便,更
重要的是制切片要适于结构容易观察的需要。如固定比较大的组织和器官时,可用其他方
法(如选择适当的固定液和延长固定的时间)来解决。
固定液的选择非常重要。固定液不仅能杀死和固定植物的组织,而且有的固定液还能
改变植物组织和细胞的结构,或者溶解其中某些物质。解剖学和细胞学研究用的固定液的
要求不同,固定还影响将来染色的结果,说明石蜡切片过程中的许多步骤,互相之间是有
关联的。比较好的方法是一种材料试用几种固定液固定,比较结果,累积经验。固定液的
浓度,一般是用浓度较低而延长固定时间,这样可使组织边缘和中间的组织都得到固定。浓
的固定液会很快地将边缘一层的组织固定,以致固定液不能再渗透到内部而固定中间的组
织。固定液的用量应该是固定材料体积的50^-100倍。
组织固定时要立即除去其中的空气,因组织中的空气会阻止固定液的渗透,而影响固
定的结果。组织中空气比较多的材料,往往浮在固定液的表面,可用交替抽气和放气的方
法排除空气,使材料下沉。含有硅质较多的材料,如在固定后随即用5%的氢氟酸处理几小
时,切片的效果较好。禾本科作物锈病的材料就可以用这种方法处理后切片;木材也能用
这种方法软化后切片。氢氟酸对玻璃的腐蚀性很强,盛氢氟酸的玻璃器皿,必须涂上一层
石蜡。
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