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制片材料可取于自然生长或人工培养的原叶体。用Costollo
氏法培养的原叶体比较洁净。方法是:填满泥炭醉于一只多孔的
花盆内,以水淋湿花盆的外面。倒置于水盆中,保持水深约3 cm.
散播蕨类孢子于花盆之外表面,罩以大玻璃饥注意保持水盆内
之水不千。在适宜的温湿条件下,培养2-3星期后,原叶体上即
可相继产生精子器和颈卵器。
制片时,将原叶体放在实体
显微镜下观察清楚精子器和颈卵
器的部位,再用锋利的刀片切去原叶体两侧的不育部分。用水洗
净材料后浸入1%铬酸一醋酸固定液或FPA内固定1天。以50%
酒精及蒸馏水浸洗各经1ho置于1%苯胺番红液内染色2天。
经各级酒精脱水,四级氯仿透明,每级中浸30 min。再经浸蜡和
石蜡包埋。切片时,平行原叶体中轴纵切,切6-8μm厚。
切片以固绿复染制成永久玻片标本。
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