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本文标题："荧光显微镜观察较厚荧光标本图像模糊的原因"
新闻来源：未知 发布时间：2014-2-28 23:36:49 本站主页地址：http://www.jiance17.com
荧光显微镜观察较厚荧光标本图像模糊的原因
共聚焦显微镜可清晰地显示相对较厚的（厚达几百微米）标本内
部结构图像，尤其适于检测荧光标本。使用传统的宽视场荧光显微镜
时，由于标本全层的荧光团都被光照到，而且它不仅收集焦平面上的
荧光信号，还收集焦平面上下方的荧光信号
所以用它来观察较厚荧光标本时，图像模糊且反差小。而共聚焦
显微镜则选择性收集来自标本内部相当于单一焦平面的光切面（约1
μm ）的光线。由于共聚焦显微镜基本没有来自离焦区的光线，所以
它所观察的焦平面内结构要比传统显微镜清晰得多。一系列不同厚度
的光切面可使标本的三维图像得以重建。
在检测组织片或完整的小生物（如果蝇和斑马鱼的胚胎）中的荧
光染色细胞时，可选用共聚焦显微镜。共聚焦显微镜也可用来定位分
离细胞内的荧光标记分子。由于其灵敏度较高，甚至可以用来监控活
体标本内的荧光，使得示踪荧光探针如绿色荧光蛋白的利用成为可能。
此外，有些型号的共聚焦显微镜加以调整后，可用于光漂白实验
及光敏化“笼锁”分子（紫外光照射前为失活状态）
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