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常见的细胞培养方法主要是细胞悬浮和单细胞培养
药用植物细胞培养
1902年Haberlandt首次尝试从开花植物的叶片中分离并培养单个细胞,
虽然他没有使游离细胞进行细胞分裂,但他的研究工作激发了其他研究者
对这方面进行探索。到现在,这一领域的研究已经取得了巨大进展,
不仅能够培养游离的细胞,还能使培养在完全隔离的环境中的单细胞进行分裂,
并产生完整的植株。常见的细胞培养方法主要是细胞悬浮培养和单细胞培养。、
细胞悬浮培养
细胞悬浮培养一般是将未分化的易碎愈伤组织转移到液体培养基中,
并使用适当的设备进行连续振荡培养。在初始和系列继代繁殖的植物
悬浮培养中被广泛使用的是摇床。
把培养介质放在摇床上振荡主要有两个目的:
一是振荡能对细胞聚合体施加轻微的压力,使其分散为较小的细胞团和
单个细胞;
其次,振荡可以使介质中的细胞和细胞团分布均匀。另外介质的振荡还
可以使培养介质和空气进行良好的气体交换。
细胞悬浮培养一般分为3种类型:
1.分批培养
是指在固定体积的培养介质中进行的细胞悬浮培养,
当培养环境中出现限制因子时,细胞停止生长,生物量不再增加。
2.连续培养
在悬浮培养中,以新鲜介质流的形式连续向培养体系提供营养,
而培养物的体积基本不变,连续加人的新鲜培养基仅与连续移出的
相等体积溢流之间保持平衡。
3.半连续培养
在半连续培养中采用的是“抽干与再装满”的方式,新鲜培养基
的加人是不连续的,而是被偶尔的“抽干与再装满”过程间隔开,
所以被移出的培养基中是被相应体积的新鲜培养基所全部取代。
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