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本文标题："使用荧光显微技术观察和测定细胞膜的光源特点"
新闻来源：未知 发布时间：2013-11-3 20:07:19 本站主页地址：http://www.jiance17.com
使用荧光显微技术观察和测定细胞膜的光源特点
荧光技术在细胞膜研究上的应用
荧光技术在细胞膜与膜蛋白的研究上主要有荧光共振能量转移
(FRET-fluorescent resonance energy transfer)、荧光淬熄(fluorescence quenching)、光漂白
荧光回复(FRAP -fluorescence recovery after photobleaching)与荧光显微技术
(fluorescence microscopy technique)。
FRET原理是一荧光物质(donor)受到特定波长的光线照射后会被激发而发出另一
特定波长的光，此能量转移的距离约7-10 nm，在此距离内若有一接收者
(acceptor)则此能量会被吸收，而荧光减弱。FRET广泛应用于膜蛋白的研究
藉由donor与acceptor标识在欲观察的分子上，便可由荧光强弱知道两种
分子结合与混合程度。Fluorescence quenching与FRET的原理类似，这类荧光分
子在高浓度(~70mM)彼此距离接近时会发生分子之间会发生self-quenching的现
象而让荧光减弱，而在低浓度时荧光较强。
Fluorescence quenching经常被运用到微胞泄漏实验，
当细胞膜上有破洞产生时，如果荧光分子外泄则浓度降低，
因而造成荧光强度变化。
FRAP的原理是在细胞膜的局部区域, 以激光光源集中激发局部区域,
让其造成分子局部的荧光漂白，再来测量荧光回复的速度
而从回复的速度可以知道脂质分子扩散速率，进而了解细胞膜相变的机制
相较于前面所提的荧光技术，荧光显微技术是一个能够直接、及时观察细胞膜上
变化的技术。当人造膜上有两种区块共存时，被标识的荧光分子会选择停留在特
定的区块而产生荧光分部不均匀，
来提供足够的反差来观察人造膜上区块尺寸大小、形状与动态行为
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