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淀粉与酪蛋白水解试验
内容
目的:判断菌种是否具水解淀粉与酪蛋白的能力。
原理:
1. α-淀粉水解酵素,可使α-1.4 及α-1.6 缩醛键结水解,实际反应机程不完全了解,但可催化α-1.4
葡萄糖键结产生水解作用,能攻击聚糖键任何淀粉颗粒质或淀粉黏胶质而形成5~9 单位α组
态混合物。要完全将淀粉颗粒质水解,需用寡-1.6 葡萄糖水解酵素(Oligo-1.6-glucosidase)
来作用在淀粉黏胶质1.6-侧键结上,于淀粉水解试验,将1%可溶性淀粉加入营养培养中,
测定时倒入数滴碘液于形成菌落周围,1 分钟后,若正反应为无色,负反应为深蓝色。
2. 将脱脂乳粉混入洋菜中,测定微生物产生酪蛋白水解酵素的能力,测定酪蛋白被水解而使培
养基由乳白色变成澄清的情形。
材料:
菌株:
1. S:(一种酵母菌)E:大肠杆菌 B:枯草杆菌
培养基:starch+NA, skim milk+NA, skim milk+casein+NA, casein+NA
步骤:
1. 2%starch+NA→starch agar(每人一片)→
S、E、B 为standard strain→37℃、24hr
→加碘液→观察正反应无色、负反应蓝黑色。
2. a.1%skim milk+NA→第一组、第三组(共12 片)。
b.1%skim milk+1%casein+NA→第二组、第四组、第八组(共17 片)。
c.1%casein+NA→第三组、第五组、第六组、第七组(共23 片)。→『37℃观察透明』
结果
1. starch+NA(+碘液)
枯草杆菌含有淀粉酶,能将淀粉分解成小分子葡萄糖,
加入碘液后无法变色,为正反应。
而S 酵母菌和大肠杆菌无含淀粉酶,所以无法将淀粉分
解,加入碘液会呈深蓝色,为负反应。
1. skim milk+NA 2.s im ilk+casein+NA 3.casein+NA
培养基上有大量不溶性分子的酪蛋白在内,因此酪蛋白的悬浊粒子使牛乳的乳白色呈现于中。当
菌株含有酪蛋白水解酵素,能将酪蛋白分解成胜肽和胺基酸,使培养基上的酪蛋白粒子消失,让
菌落周围变成澄清状
液胞
植物液胞较大,含有大的水分,可储存养分、废物及维持
细胞形
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