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针对ATP合成酶,本实验选择CyDye作为荧光标记分子,包括Cy3及Cy5,
并采用532nm绿光激光作为Cy3的激发光源。
将浓度在10~100pM等级的CyDye洋菜溶液,旋镀制成含水达99%的洋菜胶体薄膜以进行系统测试。测试的结果,无论是CCD影像分析,
或是APD光子计数量测,均显示本实验所建立的稜镜式全反射显微荧光显微术系统,确实具有进行单分子研究的能力,
其中最主要的证据系Cy3单分子单一步骤光淬灭的行为。
实验的背景荧光值仅每秒约20个单光子,讯号背景比值平均在13左右,最高达20,且咸信仍有提升空间。
在本实验系统的观测下,Cy3荧光单分子在发生光淬灭之前,约可产生100,000~1,000,000个光电子讯号。
单分子实验系统确立后,未来将可以生物马达为主角,
进行单分子动态行为分析与动力学研究,包括以Cy3配合Cy3,
进行荧光共振能量传递(Fluorescence Resonance Energy Transfer)之实验,
以期透过化学观点,探讨生物马达的工作。
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