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培养基配制_制作液体培养基步骤
原理
培养基依琼脂的浓度不同可分为液体、半固体与固体培养基。液体培养基通常不含琼脂;半固体培养基的琼脂浓度则是低于1%;
而固体培养基的琼脂含量则为15~18%。另外,固体培养基依做法的不同亦可分为斜面及平板培养基。培养基的制作即利用作法及原料比例浓度不同的原理来进行配制。
液体培养基
取25 g的营养培养基粉末,倒入250 ml的烧杯。
量取100 ml的蒸馏水或去离子水加入含有营养培养基粉末的烧杯中。
放入磁石搅拌子,并将烧杯置于电磁搅拌器上,充份搅拌使其均匀溶解。
加入1 N HCl或1 N NaOH调整培养基之pH值至73。
以塑胶滴管吸取每管9 ml之液体培养基加入玻璃试管中并盖上管盖,接着贴上灭菌指示带。
将试管置入高压灭菌釜中以121℃,15分钟进行灭菌。
待灭菌完成后进行洩压,取出试管冷却备用。
固体培养基
取135 g的营养培养基粉末与75~15 g的琼脂,倒入500 ml的血清瓶中。
量取500 ml的蒸馏水或去离子水加入含有营养培养基粉末与琼脂的血清瓶中。
放入磁石搅拌子,并将血清瓶置于电磁搅拌器上加热,充份搅拌使其均匀溶解。
加入1 N HCl或1 N NaOH调整培养基之pH值至73。
将调整pH后之血清瓶,贴上灭菌指示带。
置入高压灭菌釜中以121℃,15分钟进行灭菌。
待灭菌完成后进行洩压,取出血清瓶并将其冷却至45~50℃。
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