微生物进行革兰氏染色时应注意的事项为何?
1. 染色时,脱色过度时可使初染流失,使革兰氏阳性菌成为革兰氏阴性菌,但脱色不足不能完全去除複合物,结果是革兰氏阴性菌变成革兰氏阳性菌
2. 将载玻片以二段水充分清洗,以除去剩馀之染液
3. 宜使用未超过24小时之新鲜培养,因菌龄老化,尤以革兰氏阳性菌易失去保留出染之能力,而显示出错误的结果。且部分菌体染成紫色部分成红色。
6、 说明如何配置革兰氏染色使用的(1)结晶紫(2)碘液(3)沙番红 三种染剂
(1) 结晶紫:
溶剂a:结晶紫(2.0g) + 95%酒精(20.0ml)
溶剂b:草氨酸(0.8g) + 蒸馏水(80.0ml)
将a、b溶液充分混合。
(2) 碘液:
碘(1.0g) + 碘化钾(2.0g) + 蒸馏水(300.0ml)
将碘与碘化钾一起语言钵辗碎,加入少量蒸馏水将其洗出,再加入其馀蒸馏水(共300ml)混合均匀。
(3) 沙番红:
沙番红(0.5g) + 95%酒精(25.0ml) + 蒸馏水(100.0ml)
取0.5g的沙番红溶于25ml 95%的酒精中,混合完全后加入100ml的蒸馏水,再以滤纸过滤,过滤液才是实验中所需的沙番红。
http://www.xianweijing.org/ 显微镜百科