---
---
---(点击查看产品报价)
本文标题："大肠杆菌群及大肠杆菌同时检测法---滤膜法"
新闻来源：未知 发布时间：2012-5-27 22:44:13 本站主页地址：http://www.jiance17.com
材料与方法
检测方法
本研究所采用的检测方法大肠杆菌群除以传统的滤膜法m-ENDO培养基作检测之外，另采用本所新近公告的酵素呈色及萤光测定法Colilert（IDEXX公司），检测海水的大肠杆菌群及大肠杆菌。另外亦选用m-TEC（Difco）及Chromocult（Merck公司）两种培养基比较大肠杆菌群及大肠杆菌之检测效果（2）。肠球菌则以APHA认可的两段式培养法(即mE agar ＋EIA agar) （1）及ASTM的萤光反应检测法（3）（Enterolert）来作检测，海洋弧菌则以Thiosulphate-citrate-bile salts-sucrose（TCBS）培养基以涂抹法作检测（4）。以建立环境背景资料及比较不同方法之间的检测结果之差异，并建议适合海水微生物检测之方法。本研究中所使用之方法概要及来源如下：
NIEA E202.51B水中大肠杆菌群检测方法---滤膜法：
本方法是以含有乳糖及碱性洋红的Endo 培养基作检测，碱性洋红抑制革兰氏阳性细菌之生长，大肠杆菌群会酦酵乳糖产酸与洋红反应成为红色菌落，并形成洋红之结晶呈金属光泽。
NIEA E215.50C 大肠杆菌群及大肠杆菌Colilert萤光及呈色检测标准方法：
本方法是本方法系利用大肠杆菌群（Coliform group）能产生β-D- galactosidase酵素分解Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside（ONPG）之特性，使培养液形成黄色；以及大肠杆菌（E. coli）产生之β-glucuronidase酵素分解4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide（MUG），使培养液在波长366 nm之紫外光照射之下产生萤光，来判断水样中是否含有大肠杆菌群及大肠杆菌。
ISO/DIN 16649 Chromocult大肠杆菌群及大肠杆菌同时检测法---滤膜法：
本方法之原理是添加蛋白、sorbitol、pyruvate等营养物质使大肠杆菌群能快速生长，以tergitol 7抑制革兰氏阳性细菌、cefsulodin抑制产气单胞杆菌及假性单胞杆菌、以salmon- GAL与大肠杆菌群专一的galactosidase反应产生红色菌落及以X-GAL与大肠杆菌专一的glucuronidase 反应产生深蓝色至紫色菌落。
APHA 9213 D m-TEC大肠杆菌检测--滤膜法：
本方法系以滤膜过滤水样，检测水中的大肠杆菌。水样过滤后置于m-TEC培养基上，于35℃培养2小时，使受伤或受抑制的大肠杆菌恢复，再以44.5℃培养22小时，然后将滤膜转至含有尿素及酚红之吸放垫上15分钟，大肠杆菌会形成黄色或黄棕色菌落。
ASTM D 6503-99肠球菌Enterolert萤光检测方法：附录三
本方法系利用肠球菌群（Enterococci）能产生β-D- glucosidase酵素分解培养基内之萤光指示剂（4-methylumbelliferyl-β-D-glucoside（MUG）之特性，使培养液在波长366 nm之紫外光照射之下产生萤光，来判断水样中是否含有肠球菌。
APHA 9230C 肠球菌检测方法---m-E＋EIA滤膜法：
本方法系以滤膜过滤水样，检测水中肠球菌群（Enterococci group）细菌。该群细菌在mE培养基上，于41 ± 1℃培养48 ± 3小时会产生具粉红至红色菌落。再将滤膜转至EIA培养基上于41 ± 1℃继续培养20分钟，粉红至红色菌落与柠檬酸铁作用于滤膜之下方形成棕红色至黑色之沉淀。
海洋弧菌TCBS培养基检测方法---涂抹法：
本方法是以高浓度的硫代硫酸钠、柠檬酸钠及高pH值抑制肠内菌科细菌之生长，以添加胆盐抑制肠球菌之生长。并以瑞香草酚蓝（thymol blue）及溴瑞香草酚蓝（bromthymol blue）为指示剂，弧菌科细菌会在厌氧培养之下形成黄色至黄褐色菌落
所有资料用于交流学习之用，如有版权问题请联系，禁止复制,转载注明地址
上海光学仪器一厂-专业显微镜制造商 提供最合理的显微镜价格
合作站点：http://www.sgaaa.com/显微镜百科