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1)镜检- 结核菌可经由临床检体和组织块的直接抹片以显微镜來进行观察- 通常选用抗酸染色中的 Ziehl/Neelsen 染色,此外也可使用萤光抗酸染色
19J系列仪器属计量仪器的经典机型,几乎包括了所有几何量检测的一切手段,仪器功能全、精度高及操作简便、经久耐用,是精密机械行业的常规装备,也是各级技术监督、计量检测部门的有效检测依据,是科研、教学领域的得力助手。 1)镜检- 结核菌可经由临床检体和组织块的直接抹片以显微镜來进行观察- 通常选用抗酸染色中的 Ziehl/Neelsen 染色,此外也可使用萤光抗酸染色、免疫过氧化酶技术- 如组织内含有抗酸菌且有典型的组织病变(如:干酪样坏死、钙化、類上皮细胞、多核巨细胞及巨噬细胞),则可推断有分枝杆菌的感染2)分枝杆菌的培养- 为证实分枝杆菌的存在,应由不正常的淋巴结及肺、肝、脾等组织进行采样- 在结核菌素试验阳性但无病灶的动物,应从咽背、支气管、中膈、乳房上、颚下及肠繫膜等淋巴结以及肝脏采样- 在培养前,组织应先以均质机均质化,然后再用酸或碱,如 5%的草酸或 2-4%的氢氧化钠,去污染。此浓度可视狀况调整或以其他的化学物质來去污染- 混合后先在室温下摇晃 10 分钟,再进行中和- 以 3000-5000 g 离心 15 分钟,吸去上清液,最后吸取沈淀物最上层进行培养及镜检- 在各病例完成检测前,应将均质后的一部分检体保存在-20℃,以供不时之需。- 在进行初代培养时,通常将沈淀物接种在一系列含蛋的固体培养基上,如Lowenstein/Jensen、Coletsos及Stonebrink's等培养基。而在此一系列的培养基中,应包含添加有丙酮酸、甘油或兩者的任何一种上述培养基,而每一种条件下含 1-2 个斜面培养基,再外加 1 个琼脂培养基,如 Middlebrook 7H10 或 7H11。- 也可使用液体培养基,如 Middlebrook 7H12,进行輻射定量法,其原理是藉由离子室系统(ion chamber system)测量标有 14C 的十六酸(palmitic acid)经由代谢后所产生的 14CO2 量。輻射定量法虽可更快速的提供结果,但对污染的非典型分枝杆菌或非分枝杆菌也十分敏感- 无論有无 CO2,于 37℃下至少需培养 8 週。培养管应旋紧以免干掉。在第 1、3、5、7 週或更长时间,应检视斜面是否有菌落长出- 当菌落长出时应制做抹片以 Ziehl/Neelsen 染色检查- 一般而言,分离 M. bovis 最好的培养基是含丙酮酸钠但不含甘油的 Stonebrink's 培养基,通常在培养 3-5 週后开始有菌落长出- 当发生污染或是检体呈现阴性培养结果但有肉眼及组织病变时,则应使用所保留的样本重新培养。此外,亦可将冷冻的组织接种到至少兩只天竺鼠上进行分离,然此方法如能不使用则应尽量避免
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