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室内药剂试验
供试药剂为50%贝芬替(Carbendazim)可湿性粉剂、50%免赖得(Benomyl)可湿性粉剂、75%四氯异苯睛(Chlorothalonil)可湿性粉剂、
70%睛硫琨(Dithianon)可湿性粉剂、40%护矽得(Flusilazol)乳剂、20%依灭列(Imazalil)乳剂、80%锌锰乃浦(Mancozeb)可湿性粉剂、
20.8%比芬诺(Pyrifenox)乳剂等8种(表一)。测定药效之前,先以0.001%、0.01%、0.1%等3种药剂浓度,测定药剂对于疮痂病菌孢子发芽与菌丝生长之概略抑制范围;然后以此所测定之抑制范围浓度,配制成一系列药剂稀释浓度,选定5种在概略抑制范围之药剂浓度做为有效测定之用。
每三角瓶中装入100ml马铃薯葡萄糖琼脂培养基,杀菌后保持在55℃,加入药剂与培养基混合均匀,倒入直径9cm培养皿中,每皿20ml,俟培养基凝固即可接种病原菌。以经PDA培养4天的同缘5mm圆径PP-1菌株之菌丝块,接种于含药剂的培养基中,每处理5重複。经25℃培养6天后,观察菌丝之生长情形,并量菌落纵横直径,求其平均值当作菌丝生长直径,并与对照组(不含药剂)相互比较,以测定药剂对菌丝之生长抑制百分率。孢子发芽率测定,系以无菌水洗下PP-1菌株在PDA上培养10日的孢子,稀释调成106孢子∕ml浓度之悬浮液供试。每含不同药剂成份水琼脂(WA)皿中加入0.1ml孢子液后均匀涂抹,于25℃培养箱经12小时,每皿调查200个孢子发芽情形,与对照组比较,求其抑制百分率。药效测定以菌丝生长及孢子发芽之抑制百分率转换成机率(Probit)值,将药剂浓度转换成对数(Log.)值,并将二数据予以统计分析,求得迴归直线方程式,换算出半抑制浓度(IC50)。就室内药剂试验结果,选出可供摘果药剂试验用药剂3种;按一般田间推荐稀释倍数,四氯异苯睛500倍、护矽得8000倍及依灭列2000倍予以稀释,并添加展着剂出来通(TritonCS-7)稀释3000倍,供摘果药剂试验用;摘取田间近成熟期果径80mm以上果实,先喷布杀菌剂,待风乾后,以人工接种106/ml孢子悬浮液,如田间套袋方法,置入衬网后以塑胶袋包装,每处理4果实,各4重複。经过10日后调查发病情形,按上述公式计算发病度,比较各药剂之病害防治效果
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