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新闻来源：未知 发布时间：2012-3-29 1:11:36　本站主页地址：http://www.jiance17.com

地黄的显微镜镜检研究

药材

(1)鲜地黄—2001年 11月分别自河南怀庆药农及北京药用植物资源研究所取得刚采收之一年地黄根，冷冻保存。

(2)乾地黄—2001 年 11 月取自河南怀庆，为鲜地黄切厚片后经烘乾。

(3)地黄炮制品—胜昌药厂提供生地（乾生地，不捏成团块）及熟地，冷藏保存。—三批地黄一晒及九晒检品，冷藏保存。

2.试药及溶媒95% Ethanol、冷冻切片用冷媒（PEG 及 PG）、Paraffin、蛋白黏着剂、Xylene、Anhydrous Ethanol、75% Ethanol、50%Ethanol、Water、HematoxylinSolution、Eosine Solution、Safranin O Solution（1% in 50% Ethanol）、1%Hydrochloric acid in 50% Ethanol、Fast Green FCF Solution（0.5% inAnhydrous Ethanol）、Sudan III Solution（Saturated in 95% Ethanol）、Acacia-Sugar Solution、Canada Balsam-Xylene Solution、Glycerin-WaterSolution（1：1）

3.仪器设备

(1)电子天平—“Sartorius” BP190S

(2)冷冻切片机

(3)滑动式切片机

(4)染色槽
(5)显微镜及照相装置

(6)磨粉机

二、

方法 

1.鲜地黄、乾地黄及地黄炮制品之基原鑑定鲜地黄（北京、怀庆）、胜昌生地、胜昌熟地、第三批一晒及九晒地黄横切根部中段厚片（均 0.5 公分）。

鲜地黄以石蜡包埋切片法及徒手切

片法，地黄炮制品以冷冻切片法进行组织切片。

(1)石蜡包埋切片法检品经以下步骤依序操作后，

镜检观察地黄特征：栓皮细胞、分泌细胞、维管束及导管。A.固定将类圆形横断面依轴心半径性纵切为 4~5 片，分别放入镂空有盖之小盒内，浸于固定液（Anhydrous Ethanol）1~2 日。B.渗蜡、埋蜡C.切片蜡块以滑动式切片机切片，切好之薄片置于水中伸展开。D.张贴切片载玻片上滴蛋白黏着剂，涂开。将此载玻片捞起薄片，烘乾至完全乾燥。E.染色脱水及封片a. Hematoxylin-Eosine 染色法（细胞壁呈红色，核呈紫色）切片浸于Xylene中10~15分钟以溶去Paraffin，再浸于AnhydrousEthanol 10~15 分钟以溶去 Xylene。滴加Hematoxylin Solution 1~2分钟，移至水中，水洗。滴加 Eosine Solution，再移至水中，水洗，完成染色。切片依序浸于 50% Ethanol、75% Ethanol、95% Ethanol、AnhydrousEthanol 及 Xylene 各约 1 小时以脱水。已脱水之切片滴加 Canada Balsam-Xylene solution，加盖玻片，静置过夜，完成封片；也可将未脱水之切片滴加Acacia-sugar solution封片。b. Safranin-Fast Green染色法（木栓化及木质化细胞壁呈红色，其他呈绿色）切片同 a法溶去 Xylene 后依序浸于95%Ethanol、75% Ethanol 各约 10~15 分钟。切片浸于Safranin O solution过夜（16 小时以上）